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❀ 产品描述
pGK2.2 是一种高效、精准的基因编辑载体，它是基于人工核酸内切酶 CRISPR/Cas9 而研发的，相对于传统敲除技术和 TALENs、ZFNs 技术而言，其操作更加简便，敲除效率最高，基因的编辑更加的精准，大大降低了脱靶机率。该载体能够适用于几乎所有哺乳动物细胞的基因修饰研究。
pGK2.2 载体包含 Cas9 核酸酶表达框和 Guide RNA (gRNA) 克隆框，gRNA 克隆框能够快速高效的克隆编码靶标特异的 CRISPR RNA (crRNA )的 DNA 片段。该载体含有两个敲除插入位点，可以实现基因片段的敲除，另外，它还含有 EGFP/Puro 的双筛选标记，让您仅靠单个载体就可以轻松地完成基因组DNA 的编辑，实现精准、低 off-target 的基因编辑体验。
※注：pGK2.2 在原核中是呈现卡那霉素抗性的，卡那霉素抗性基因编码的是新霉素磷酸转移酶II,基因记做 Neo,能通过降解 G418、新霉素和卡那霉素来实现真核和原核细胞的相应抗性，所以其既可以在原核生物中表达使大肠杆菌等表现出卡那霉素抗性，也可以再真核生物中表达使动植物细胞表现出G418抗性。
❀ 产品优势
● 精准的修饰：Cas9 蛋白无特异性，降低脱靶效应，实现精准的基因编辑；
● 敲除效率高：较传统技术和TALENs、ZFNs技术，敲除效率最高；CRISPR/Cas9 系统的两大功能组件于一个载体上，转染效率更高；
● 双敲除：具有两个启动 gRNA 的启动子，两个敲除插入位点，可以实现基因片段的敲除；
● 操作简便：编码 sgRNA 的 DNA 片段小于 100 bp，这些使操作更加简便。
❀ 保存条件
-20 ℃
❀ 注意事项
因为 Cas9 蛋白比较大，就导致整个敲除质粒较大（11 kb左右），如此大的质粒很容易导致转化效率低下，尤其是使用脂质体等化学试剂转染时，转染效率会比较低些。所以，我们推荐使用电转的方法进行转染。吉锐生物的Celetrix细胞电转仪（型号 CTX-1500A；Cat. No. GP7901,GP7902），转化效率高，可适用于难转染的细胞系。
| Cat. No. | 产品名称 | 规格 |
| GP0140 | pGK2.2 (EGFP/Puro) | 4 μg |
