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（含RNA pure） 产品编号：M005
包装规格：50T/100T
产品简介
本公司的离心柱式通用RNA提取试剂盒是一种基于离心柱法从细胞、组织及细菌中高效、高质量地抽提抽提总RNA的试剂盒，所抽提RNA可以用于如反转录、RT-PCR、qPCR、cDNA克隆等下游实验。
本试剂盒抽提总RNA的得率高、纯度高。
下图为本试剂盒与YD、In品牌同类产品的RNA抽提效果对比。样品为50万个293T细胞，洗脱液用量均为50μl，取5μl洗脱样品在1%琼脂糖凝胶中电泳约8分钟后拍照。
实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，本图仅供参考。
| YD | In | PH | ||||
| 浓度(ng/uL) | 176 | 236 | 238 | 240 | 242 | 232 |
| A260/280 | 1.724 | 1.751 | 1.891 | 1.95 | 1.877 | 1.949 |
| A260/230 | 2.086 | 2.193 | 2.079 | 2.008 | 2.128 | 1.993 |
试剂盒组成
| 组分 | 50T | 100T | 保存 |
| Lysis Buffer | 50mL | 100mL | 2-8℃ |
| Wash Buffer Ⅰ | 30mL | 30mL×2 | RT |
| Wash Buffer Ⅱ | 15mL | 15mL×2 | RT |
| Rnase-free water | 15mL | 15mL×2 | RT |
| Spin cartridges(with collection tubes) | 50 | 100 | RT |
| Recovery tubes | 50 | 100 | RT |
| RNA pure | 12mL | 22mL | RT |
注意事项
- 本产品仅限于科学研究使用。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴护目镜、一次性手套和口罩操作。
- 所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，避免环境中RNA酶污染样品。
- 需自备无水乙醇。
- 样本处理：
b. 贴壁细胞：吸尽培养基，每106细胞加1mL Lysis Buffer，吹打混匀。
c. 悬浮细胞：离心收集细胞，每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1mL Lysis Buffer，吹打混匀。
- 室温放置5min，使核酸蛋白复合物完全分离。
- 每1mL样品中加0.2mL RNA pure，盖好管盖，剧烈振荡15s，室温放置3min，4℃ 12000 rpm离心15min。
- 吸附柱预处理：向吸附柱中加入500μL Wash Buffer Ⅰ，室温静置2min，4℃ 12000rpm离心2min，弃废液。
- 小心吸取步骤3中上层无色水相至新管中，并加入200uL乙醇吹打混匀，转移混合物至吸附柱中，室温放置2min，4℃ 12000rpm离心15s，弃废液。
- 向吸附柱中加入600μL Wash BufferⅡ(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，4℃ 12000 rpm离心15s，弃废液。重复洗涤一次，弃废液。
- 4℃ 12000rpm离心2min，弃掉收集管。
- 将吸附柱放入新管中，向膜中央滴加40-100μL RNase-free water，室温放置2min，4℃ 12000rpm离心2min即得到RNA。
- RNA得率低
- RNA降解
- 样本保存不当，样本收集后需立即进行下游实验，或保存于-80℃；
- 实验相关器皿耗材都应为RNase-free。
- RNA被污染
- A260/A280比值低
- 样本未充分裂解，需降低初始样本量；
- 样本被污染，离心分层后不要转移全部上层水相；
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仪器类
无锡菩禾生物技术有限公司（简称“菩禾”）成立于2013年，位于无锡国家生物产业基地---百桥生物科技园，是一家集成细胞生产、应用的高新技术企业。专注于为药企、各类科研机构及CRO企业提供符合标准规范的细胞资源、细胞培养基、细胞检测试剂盒和细胞培养设备。公司还建有完善的细胞建系、细胞筛选、细胞建库、细胞检测等技术服务体系。目前建有的技术平台有细胞生物学测试平台、原代细胞分离平台、动物实验平台、免疫学平台及分子生物学平台。
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