CloneUFO® One Step Cloning Kit

产品介绍 CloneUFO® One Step Cloning 一步重组酶克隆技术 CloneUFO® One Step Cloning 技术是一种快速 Fast、高效 Efficient、简便 Easy 的 DNA 定向克隆技术，可将目的基因的 PCR 产物定向克隆至任意载体的任意位点。CloneUFO® One Step Cloning 试剂盒是 T4 噬菌体某基因进行异源表达获得的重组酶为核心的全新一代重组克隆试剂盒，该试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶 UvsXase® II。UvsXase ® II 能够兼容常规酶切、PCR 反应体系。克隆载体酶切产物或 PCR 产物和目的基因 PCR 产物可以不进行 DNA 纯化直接用于重组克隆，极大的简化了实验步骤。 CloneUFO® II One Step Cloning 作为新一代重组克隆试剂盒，对重组 Enzyme Reaction 体系进行了优化，极大地提高了转化效率，阳性率可达 95%以上。高度优化的反应缓冲液及增强的重组酶 UvsXase® II，显著提高克隆的重组效率与对杂质的耐受度。 基本步骤：将载体在克隆位点进行全质粒扩增，得到线性化载体；设计同源引物，使得目的片段 PCR 产物的 5’和 3’末端分别带有和预插入的线性化载体前后两末端完全一致的序列 (15 bp ~ 20 bp)；将扩增好的目的基因 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后，在 UvsXase ® II 的催化下，仅需反应 30 min 即可进行转化，完成定向克隆。克隆阳性率可达 95%以上。
  产品特点 -简单、快速、高效 -适用于向几乎任何载体的任何位点进行定向克隆 -无需考虑载体和目的基因片段上的酶切位点 -可高效克隆 50 bp ~ 10 kb 片段 -线性化载体和 PCR 产物可不进行纯化直接克隆 -不依赖于连接酶及磷酸酶，克隆阳性率可达 95%以上
  产品应用 -快速克隆 -无缝克隆 -高通量克隆 -DNA 定点突变
  产品组成

组分	C111 ( 25 rxns )	C111 ( 50 rxns )
UvsXase® II	50 μl	100 μl
UFO  Buffer	100 μl	200 μl

 

 

  储存条件 -20℃保存，于-20 ~ 0℃运输。▲避免反复冻融。
  实验流程图
  Fig. 1 使用 UvsXase® II 进行单基因克隆实验流程图