Language
本试剂盒通过PCR扩增和依赖于T7 RNA聚合酶的转录两步法高效产生靶向目的基因的sgRNA。本试剂盒提供了预混合的Scaffold Template，Scaffold Template包括与使用者设计的目标特异性序列部分重叠的长度为80nt序列以及用于扩增该序列的引物，退火形成互补链后由DNA聚合酶进行聚合，并最终生成用于转录的双链DNA模板。利用本试剂盒提供的试剂和使用者自己设计的特异性DNA序列，单管反应可在0.5h-4h内获得10-40μg功能性的sgRNA。
产品原理
图4. 碧云天生产的BeyoCRISPR™ Two-Step sgRNA Synthesis Kit (D7083)合成sgRNA的原理图。
产品特点
产量多：每次反应获得10-40μg sgRNA，每个反应的产量比一步法多约1倍；
性价比高：自主研发，性价比高；
应用广泛：获得的sgRNA可以用于体外分析和鉴定sgRNA的效果，也可以用于转染表达Cas9的细胞以实现目的基因的基因编辑。
*碧云天生产的BeyoCRISPR™ One-Step sgRNA Synthesis Kit (D7081)和BeyoCRISPR™ Two-Step sgRNA Synthesis Kit (D7083)的主要差别在于一步法操作简单仅需一步反应，但产量仅为两步法的约一半；两步法操作略复杂，但每个反应的产量比一步法多约1倍。
产品效果
图5. 碧云天生产的BeyoCRISPR™ Two-Step sgRNA Synthesis Kit (D7083)合成sgRNA的效果图。如图所示，使用本试剂盒可以很好地合成sgRNA，并且在图中所示的反应时间内，反应时间越长，合成的sgRNA的产量越高。
图6. 碧云天生产的BeyoCRISPR™ Two-Step sgRNA Synthesis Kit (D7083)合成的sgRNA引导Cas9核酸酶切割目的基因的效果图。如图所示，使用本试剂盒合成的sgRNA可以有效引导Cas9 Nuclease充分切割目的DNA。
