polysciences 24765-1 PEI转染试剂

根据您的描述，24765-1 是 PolySciences 公司生产的一款 聚乙烯亚胺（Polyethylenimine, PEI） 转染试剂。PEI 是一种阳离子聚合物，广泛用于将 DNA 或 RNA 导入哺乳动物细胞中，尤其是在大规模蛋白质表达和悬浮细胞转染中表现出色。

以下是关于 PolySciences 24765-1 产品的详细介绍：

产品概述

产品特点

高效转染：

适用于多种哺乳动物细胞系，尤其是悬浮细胞（如 HEK293、CHO 细胞）。

能够实现高转染效率和高蛋白表达水平。

低成本：

相比于商业化脂质体转染试剂，PEI 的成本更低，适合大规模实验。

低细胞毒性：

在优化条件下，PEI 对细胞的毒性较低，能够维持较高的细胞存活率。

稳定性：

PEI-DNA 复合物稳定性高，适合长时间转染实验。

应用领域

蛋白质表达：用于大规模重组蛋白生产，尤其是在 HEK293 和 CHO 细胞中。

基因功能研究：用于过表达或敲低特定基因，研究其功能。

病毒包装：用于慢病毒或腺病毒包装系统中的质粒转染。

使用方法

以下是使用 24765-1 进行转染的一般步骤（具体操作需参考产品说明书或文献）：

1. 试剂准备

①　将 PEI 粉末溶解于无菌水中，配制成 1 mg/mL 的储存液。

②　用 0.22 µm 滤器过滤除菌，分装后保存于 -20°C。

2. DNA-PEI 复合物制备

①　将 DNA 与 PEI 以一定比例（通常为 1:2 或 1:3，DNA:PEI 质量比）混合于无血清培养基中。

②　室温孵育 15-30 分钟，形成 DNA-PEI 复合物。

3. 细胞转染

①　将 DNA-PEI 复合物均匀加入细胞培养物中，轻轻混匀。

②　在 37°C、5% CO₂ 培养箱中继续培养。

4. 换液与检测

①　转染 6-24 小时后更换新鲜培养基。

②　根据实验目的，在 24-72 小时后检测转染效率或蛋白表达水平。

优化建议

DNA 与 PEI 比例：

不同细胞类型和实验目的可能需要优化 DNA 与 PEI 的比例。通常建议从 1:2 或 1:3（DNA:PEI ，质量比）开始尝试。

细胞密度：

确保细胞在转染时处于对数生长期，密度适中（通常为 70-90% 融合度）。

培养条件：

悬浮细胞（如 HEK293 或 CHO 细胞）需要调整细胞密度和培养体积，以达到最佳转染效果。

注意事项

无菌操作：

转染过程中需严格保持无菌操作，避免污染。

毒性控制：

PEI 的用量过高可能导致细胞毒性，需根据细胞类型调整用量。

储存与稳定性：

PEI 储存液在 -20°C 可长期保存，避免反复冻融。

技术参数

分子量：25 kDa（典型值，具体以产品说明书为准）

pH 值：7.0-9.0（1 mg/mL 水溶液）

溶解性：易溶于水，形成透明溶液

储存温度：室温或 4°C（干燥避光）

参考文献

如果需要更详细的使用方法或优化条件，可以参考 PolySciences 提供的产品说明书，或查阅相关文献（如 HEK293 或 CHO 细胞转染的经典方法）。

总结

PolySciences 24765-1 是一款高效、低成本的 PEI 转染试剂，特别适合大规模蛋白质表达和悬浮细胞转染。通过优化实验条件，用户可以在多种哺乳动物细胞中实现高转染效率和高蛋白表达水平。如需更多信息，建议联系 柏莱源生物 官方网站或联系其技术支持团队。