对比数据:
【产品名称】
磁珠法DNA凝胶快速提取试剂盒
【包装规格】
50 tests / 盒
【产品简介】
1.磁珠法DNA凝胶回收试剂盒是一种使用新型核酸纯化介质,包被的磁珠,用于稳定、高效、便捷地从DNA琼脂糖凝胶 中回收目的DNA的试剂盒.本试剂盒适合PCR产物、质粒DNA酶切出来的DNA片断、超螺旋质粒DNA单酶切后的线性化产物或DNA连接产物等在琼脂糖凝胶电泳后切胶产物的回收。纯化所得DNA可直接用于酶切、连接、转化细菌、测序、PCR、杂交等后续操作。
2.本试剂盒的原理和主要操作过程步骤是琼脂糖凝胶在融胶液中迅速融解,DNA充分释放,再与磁珠特异性结合,在外界磁场(如磁分离架)的作用下,磁珠与相应溶液可以快速而高效地分离,经洗涤充分除杂质,最后用洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来,即可获得高纯度的目的DNA样品。
【试剂盒组成】
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
融胶液 | 25mL | 常温 |
洗涤液一 | 35mL | 常温 |
洗涤液二 | 9mL(第一次使用前加入27ml无水乙醇,混匀) | 常温 |
磁珠悬浮液 | 1.5mL | 常温 |
洗脱液 | 5mL | 常温 |
【储存条件及有效期】
储存条件:常温。
运输条件:常温。
有效期:24个月。
注意事项:第一次使用前在每瓶溶液II (洗涤液)中加入指定量的无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
【手工提取方法】
1.切胶回收后,称重,将胶切碎或在离心管内用1ml枪头捣碎。
2. 加入等体积的融胶液,如胶为100mg,则加100微升融胶液,涡旋或颠倒混匀。
3. 50-60ºC水浴加热约10分钟至胶全融,期间需轻微涡旋或颠倒混匀3-4次,以加速凝胶融解。
(注意:如果胶碎片较小,3-5分钟即可全融,凝胶碎片较大则需较长时间,胶全融后至少再加热2分钟。50-60ºC间任一温度都适合于本试剂盒。如果DNA片断大于5kb,宜颠倒混匀,涡旋容易导致大片断DNA断裂。)
4. 在离心管加入30微升磁珠悬液(使用前务必混匀),涡旋混匀,室温放置3-5分钟。将离心管置于磁力架中,待磁珠完全聚集后,小心吸除残液。
5. .取下离心管,加入700μL洗涤液一,盖上管盖,涡旋10-30s,上磁力架,吸磁30s,打开管盖去除废液。
6. 取下离心管,加入700μL洗涤液二,盖上管盖,涡旋10-30s,上磁力架,吸磁30s,打开管盖去除废液。
7..瞬离,上磁力架,去除管底残留液体,室温静置3min。
6.加入20-100μL洗脱液,盖上管盖,充分涡旋混匀10-30s,75℃孵育2-5min,上磁力架吸磁1min,取上清转移到新的离心管中,用于下游检测。
注:如不马上使用,建议-20℃保存。
【上机提取】
1.使用前检查预分装板是否有漏液破损等现象,如果有则禁止使用。
2.将试剂平放于桌面,撕封口膜时避免振动,防止液体溅出。在孔板孔位 1 中加入样本,将孔板放入核酸提取仪中,装上磁棒套,确认磁棒套安装到位,注意交叉污染。
3.按照表2在96孔板中加样。
4.按照表3运行程序。
表2 试剂组成成分
试剂名称 | 孔位 | 体积 |
融胶液 | 1/7 | 100-500μL |
磁珠悬浮液 | 2/8 | 400μL(370μL磁珠保存液+30μL磁珠原液) |
洗涤液1 | 3/9 | 700μL |
洗涤液2 | 4/10 | 700μL |
洗脱液 | 6/12 | 50μL |
表3 上机程序
步骤 | 孔位 | 混合时间 | 磁吸时间 | 等待时间 | 体积 | 混合速度 | 温度 |
1 | 2 | 10min | 1min | 0 | 500μL | 中 | 55℃ |
2 | 1 | 3min | 1min | 0 | 600μL | 中 | 56℃ |
3 | 3 | 1min | 1min | 0 | 700μL | 快 | 0 |
4 | 4 | 1min | 1min | 2min | 700μL | 快 | 0 |
5 | 6 | 3min | 2min | 0 | 50μL | 快 | 75℃ |
6 | 2 | 30s | 0 | 0 | 400μL | 快 | 0 |
注:如不马上使用,建议-20℃保存。
【注意事项】
1. 所有操作须严格按说明书进行。
2. 实验操作过程中用过的所有枪头,均需打入盛有84消毒液的废液罐中。
3. 检测不同的样本时,应在各管上做好标记,避免样本混淆。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗。