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| 一款合成高质量、高产量mRNA的体外转录（IVT）试剂盒 ·通过体外转录（IVT）合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA；※ Cap类似物不包含在本产品中 ·优化的T7 RNA聚合酶用于IVT反应，RNA合成效率高、产量大； ·独立包装的NTPs，方便修饰NTPs替换，且不影响mRNA产量； ·采用In-Fusion无缝克隆，轻松构建模板质粒DNA； ·使用氯化锂（LiCl）溶液进行RNA纯化，可立即进行下游应用。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 制品说明 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 本试剂盒以含有 T7 启动子序列的双链 DNA 为模板，使用优化的高效T7 RNA聚合酶，通过体外转录可合成大量mRNA。除此以外，还包含用于IVT反应后消化模板DNA的DNase I和用于纯化mRNA的氯化锂 (LiCl) 溶液。真核细胞翻译蛋白质需要RNA的5'端有Cap结构，本试剂盒配合使用CleanCap Reagent AG（TriLink公司的Cap类似物）可以高效制备具有Cap结构的mRNA。另外，试剂盒包含单独的NTPs，方便优化或使用修饰NTPs如假尿苷替换，而且不会明显降低mRNA的产量。使用本产品，每次反应（20 μl 反应体系）可以合成高达 200μg 或更多的RNA。可以根据需要放大反应体系，即使使用10倍（200μl）反应体系也不影响mRNA预期产量（请参考说明书实验例）。※Cap类似物不包含在本产品中，请另外准备CleanCap Reagent AG (TriLink公司)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 用途 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| · 用于体外转录（IVT）模板质粒DNA的构建 · 配合使用TriLink公司的CleanCap Reagent AG体外转录合成mRNA · 使用其它Cap类似物如Anti-Reverse Cap Analog (ARCA)合成带帽结构的mRNA (* 请注意，使用ARCA时，需要设计与本产品不同的模板序列。) · 用于长链非编码RNA（Long non-coding RNA）的合成 · 向导RNA（guide RNA）的合成 · siRNA前体的合成 · 用于RT-qPCR的RNA标准模板的合成 · RNA探针的合成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 制品内容 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit（Code No. 6144）（20次量、20 μl反应体系） | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| *2：由T7 启动子 + 5'UTR + FLuc-CDS + 3'UTR + Poly (A) 序列组成的线性质粒DNA。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 实验操作注意事项 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| · 本制品是通过IVT反应合成RNA的试剂。如果双链DNA模板、试剂、试管、微量移液器吸头或反应中使用的其他材料混入RNase污染，会导致使用本试剂盒获得的RNA收量降低或片段化。在反应中使用专用试管和微量移液器吸头，并戴上新的一次性手套以防止RNase污染。 · 10X Enzyme Mix 不要剧烈搅拌。 · 使用前将Lithium Chloride Precipitation Solution在室温下融化。融解后，如果充分混合后仍可见沉淀，可37℃保温溶解。如果仍有沉淀物，请直接使用，对性能没有影响。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| -20℃ | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ■ 试剂盒以外的其它必要试剂（主要试剂） | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| · CleanCap Reagent AG（TriLink公司） · 修饰NTPs · 限制酶（Hind III等等） | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
