胱天蛋白酶Caspase 荧光底物 FITC-C6-DEVD

胱天蛋白酶Caspase 荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿
英文名称：FITC-C6-DEVD-FMK 产品参数

Ex (nm)	491	Em (nm)	516
分子量	994.99	溶剂	DMSO
存储条件	在零下15度以下保存, 避免光照

产品概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，的caspases在凋亡中占有主导地位，FITC-C6-DEVD-FMK能提供简便灵敏的方法对活细胞中对的caspase-3进行检测。FITC-C6-DEVD-FMK在凋亡细胞中具有通透性，性和不可逆结合的caspase-3的特点，是带有FITC荧光标记的caspase-3抑制剂。FITC标记能直接通过荧光显微镜，流式细胞仪或者荧光酶标仪测定的Caspase 3。

实验方案

操作方法

以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。