2×BioRun Pfu PCR Mix（+dye）

2×BioRun Pfu PCR Mix

货号：#RAC00

规格：5mL/包

保存：-20℃，1年

产品说明

2×BioRun Pfu PCR Mix是一种即用型的高保真PCR Mix，仅需要加入DNA模板和引物即可进行PCR扩增。2×BioRun Pfu PCR Mix中的DNA聚合酶经过蛋白质工程技术改造，具有优秀的持续合成能力和保真性，适合较长片段的高保真扩增，该聚合酶的保真性是Pfu DNA聚合酶的2倍，扩增速率是Pfu的4-8倍。Mix还添加了延伸促进辅酶和解产物抑制辅酶，使其在长片段扩增、高产量方面有极大提高。经过严格质控，2×BioRun Pfu PCR Mix无非特异性核酸酶活性残留，无宿主基因组DNA残留，适用于实验室常规克隆及高保真克隆。

产品特点

1、超高保真性，连续扩增12kb质粒DNA无差错；

2、长片段扩增，可扩增20kb的质粒/病毒DNA片段；

3、产量高。

适用范围

高保真PCR，载体构建，定点突变，同源重组

产品组成

活力单位定义：在72℃、30min内，催化10nmol脱氧核苷酸加入到酸性不溶物沉淀中所需的酶量。

质量控制

1、以2kb/min的速率从10ng λDNA上扩增10kb DNA片段，25个循环即得到5-10μg目的产物；

2、以2kb/min的速率从水稻基因组DNA上扩增1.2kb DNA片段，30个循环即得到至少5μg目的产物；

3、2×BioRun Pfu PCR Mix与pUC19质粒在CutSmart buffer中37℃孵育16h，DNA无任何变化。

推荐的PCR体系与条件

①PCR体系：

②PCR条件：

引物Tm值计算工具

扩增实例

①2×BioRun Pfu PCR Mix扩增pET-30a(+)载体（约5kb），26个循环。

②2×BioRun Pfu PCR Mix从水稻基因组DNA上扩增1.3kb启动子片段，30个循环。

③2×BioRun Pfu PCR Mix用于多片段一次性组装克隆（配合2×Seamless Cloning Mix 货号：#RDA01），30个循环。

④2×BioRun Pfu PCR Mix连续扩增12kb质粒DNA的碱基错误率。

注意事项

1、扩增高GC片段时，如果条带弱请适当增加变性和预变性时间，并适当降低延伸速率。

2、当引物特异性较差时，推荐使用降落PCR程序。

3、本产品主要用于高保真克隆，菌落PCR、动植物组织扩增请选择伯远其他聚合酶产品。

4、2×BioRun Pfu PCR Mix扩增产物为平末端，无法用于TA克隆，请知悉。