雅酶CX007 细胞周期检测试剂盒

细胞周期检测试剂盒
Cell Cycle Assay Kit
本产品需冰袋运输；-20℃避光保存，保质期12个月。

货号规格
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产品概述

      本产品可应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测。

      通常正常细胞的 G0/G1 期具有二倍体细胞的 DNA 含量 (2N)，G2/M 期具有四倍体细胞的 DNA 含量 (4N), 而 S 期的 DNA 含量介于 2N 和 4N 之间，利用碘化丙啶 (PI) 可与细胞 DNA 结合的特性，通过流式细胞术对细胞内 DNA 含量进行检测，然后根据 DNA 含量的分布情况，可以进行细胞周期和细胞凋亡分析，计算出处于细胞周期不同时期的细胞所占的百分比。

产品内容

操作步骤

1. 实验准备：用 ddH2O 配置 70% 乙醇，置于 -20℃过夜预冷；

2. 样本处理：
go(1) 按实验方案对细胞进行处理后，收集约 5×105 个细胞；
go(2) 300×g 离心 5 min，弃上清；
go(3) 加入 1 mL PBS ( 货号：CB012) 洗涤，300×g 离心 5 min，弃上清。

3. 固定：向细胞中加入 1 mL 预冷的 70% 乙醇，重悬细胞并混匀，置于 -20℃固定 1 h 或过夜；

4. 300×g 离心 5 min，弃上清，加入 1 mL PBS 重悬细胞，室温放置 15 min；

5. 固定：将甲醇与冰乙酸按3:1(V/V)混匀配置成固定液，并在上一步得到的细胞沉淀中加入1mL新鲜配制的固定液，混匀后，补加固定液至8mL，室温静置25min；

6. 加入 400 μL PI 染色液 并充分混匀，2~8°C 避光孵育 10 min；

7. 300×g 离心 5 min，弃上清，加入 1 mL PBS 重悬细胞，立即进行 流式细胞术检测 ，记录激发波长488 nm 处红色荧光。

结果验证

注意事项

1. 请勿使用PBS配制70%乙醇，否则会导致蛋白质在固定过程中发生沉淀；

2. PI染色液 易发生荧光淬灭，实验操作和保存时请注意尽量避光；

3. PI染色液 对人体有害，请避免直接接触或吸入体内；

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴口罩和一次性手套操作；

5. 本产品仅限科研使用。