
质量水平
100
用途
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions
保质期
≤18 mo.
特点
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
包装
kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5620)
kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5621)
manufacturer/tradename
Roche
technique(s)
PCR: suitable
genotyping: suitable
input
crude DNA
储存温度
−20°C
一般描述
KAPA2G Fast HotStart®小鼠基因分型试剂盒包含KAPA Express Extract(一种新型热稳定蛋白酶)、缓冲系统(能够在短短15分钟内从小鼠组织中提取出颗粒剂用于PCR的DNA)以及含染料的KAPA2G快速基因分型混合物,其中,混合物含有的DNA聚合酶通过定向进化技术改造而具有高持续性和超高速。KAPA Express Extract和KAPA2G快速基因分型混合物的组合可在低至1小时内从小鼠组织中可靠地提取和扩增DNA片段,而传统方案则需要超过1天的时间。KAPA2G Fast基因分型混合物(2X)是一种即用型预混合液,其中包含用于快速PCR的所有组分和稳定剂,以及除引物和模板外的两种惰性染料。应用
KAPA2G Fast HotStart®基因分型混合物已被用于:- 基因组DNA提取和PCR预混液的制备
- 从小鼠尾巴、耳朵和脚趾组织中提取和扩增
- 其他动物组织DNA的提取和扩增
生化/生理作用
KAPA2G Fast基因分型混合物产生的DNA片段进行3′-dA-tailed处理,并可克隆进TA克隆载体,或用于常规下游分析或应用,包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样,KAPA2G Fast 具有 5'→3'聚合酶和 5'→3'核酸外切酶活性,但是没有3'→5'核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G Fast的精确性与野生型Taq相近;错配率约为每结合1.7 x 105个核甘酸错配1次。和依赖蛋白酶K消化的现有方案不同,采用KAPA Express Extract试剂盒可以在单个试管中方便地进行萃取,无需使用危险的化学物质或多个洗涤步骤。特点和优势
提高生产能力、周转时间时间和可靠性:- PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
- 最低限度的处理,从而降低样本丢失或污染的风险
- 有充足模板用于多种测定;易于缩放,以处理 96 孔格式的样本
- 快速可靠地扩增各种扩增子长度和GC含量各异的DNA片段
优于粗提取方法和商业试剂盒:
- 周转时间增加
- 特异性增强
- 成本降低
快速提示:
- 15 分钟从小鼠尾、耳或趾组织中提取 PCR-ready DNA
- PCR 前在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0-8.5) 中稀释 DNA 提取物 10 倍,用 1μL DNA/25μL 反应。
- 提取液在-20℃ 下可稳定储存 6 个月以上。
- KAPA2G快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G快速DNA 聚合酶,以及缓冲液、MgCl2 (1.5 mM,1X) 和 dNTP (每种0.2 mM,1X)。
- 电泳上样染料包含在 KAPA2G 快速基因分型混合物中,可将 PCR 产物直接上样到琼脂糖凝胶上进行分析。
- 对于 1 kb 的扩增子,使用 15 s 退火时间,15 s 延长时间;对于更长的扩增子,使用 15-30 s/kb 延长时间。
包装
- 2X KAPA2G 快速标准或热启动基因分型混合物(含染料)
Ships on Dry Ice in some cases however, shipping conditions may vary in certain regions.
质量
KAPA2G Fast HotStart Mouse Genotyping Kits 包含的所有组分均经过严格的质量控制检测,无污染的外切和内切酶活性,符合 DNA 污染的严格要求。制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下,以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染,试剂盒在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意,储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。产品声明:
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