KeyTec® cAMP TR-FRET KIT

研究背景 G蛋白偶联受体（GPCRs）是人类最大的膜蛋白家族，大约有800个成员，其中一半是嗅觉受体。这些GPCRs分布在细胞膜表面，接受不同配体的刺激，包括：光线、激素、气味、抗原、神经递质甚至另一个细胞的表面信号分子。参与调节几乎整个身体系统，从感觉接收到调节细胞活动、运动和死亡。尽管GPCRs和其配体数量多，GPCRs与配体结合后胞内信号的传导通过四个G蛋白家族(Gαs、Gαi/Gα0、Gαq/Gα11和Gα12/Gα13)来实现。G蛋白是异源三聚体，由三个不同的亚基组成：一个α亚基、一个β亚基和一个γ亚基。GPCRs信号转导机制主要分为三类：Gq(磷脂酶C)、Gi和Gs(分别抑制和刺激腺苷酸环化酶，调节cAMP产生)。细胞内cAMP的定量测定可用于评价药物对腺苷酸环化酶激活或抑制作用的效价。 试剂盒原理介绍 当反应体系中不存在未标记的cAMP时，由biotin标记的cAMP和SA标记的Eu组成的cAMP示踪复合物与染料Rd标记的抗体结合。通过外部激发cAMP示踪复合物的Eu，实现能量共振转移到Rd标记的抗体上，使得反应体系中检测到很强的665 nm信号。当检测样品中存在未标记的cAMP，cAMP示踪复合物与Rd标记抗体的结合被阻断，Eu激发后无法实现能量共振转移，反应体系中检测到的665 nm信号降低。