Language
FlaPure Plant DNA Extraction Kit
高效植物基因组DNA提取试剂盒
目录号
DE711-50
产品组成
| 组分 | 规格（50次） |
| Buffer GP1 | 40 mL |
| Buffer GP2 | 10 mL |
| Buffer GP3 | 21 mL |
| Buffer GW2 | 15 mL |
| Buffer TE | 10 mL |
| RNase A（10 mg/mL） | 300 µL |
| FlaPure DNA Columns | 50个 |
| Collection Tubes（2.0 mL） | 50个 |
保存条件
10~25℃保存12个月。
产品简介
本试剂盒采用高效结合核酸的离心柱配合独特的缓冲液系统，适合从50~100 mg普通植物中提取基因组DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿，整个提取过程只需30~40 min，可最大限度去除植物组织中的杂质，提取的基因组DNA片段完整、纯度高，可直接用于下游PCR扩增、qPCR、分子标记以及文库构建等实验。
产品特点
- 操作简便：30~40 min内完成数个样品的基因组DNA提取；
- 安全低毒：无需酚、氯仿等有毒试剂；
- DNA纯度高：提取的基因组DNA无杂质残留，适用于对纯度、完整性要求很高的下游实验。
适用范围
本产品适用于普通植物样品的基因组DNA提取。
注意事项
- 第一次使用前应在Buffer GP3和Buffer GW2中加入无水乙醇，加入量请参考瓶上标签；
- 植物组织样品应避免反复冻融，否则会导致提取的基因组DNA片段小且得率低；
- 使用前请检查Buffer GP1和Buffer GP2是否出现结晶或者沉淀，如有沉淀，请置于37℃水浴溶解摇匀后使用；
- 本试剂盒所有离心操作均在室温下进行。
使用方法
- 取植物新鲜组织50~100 mg或干重组织20 mg，加入液氮充分研磨。加入400 μL Buffer GP1和6 μL RNase A(10 mg/mL)，涡旋振荡1 min，室温放置10 min，使其充分裂解；
- 加入130 μL Buffer GP2，充分混匀，涡旋振荡1 min；
- 12,000 rpm（~13,400×g）离心5 min，将上清移至新的离心管中；
- 加入1.5倍体积的Buffer GP3（使用前检查是否已加入无水乙醇）（例如500 μL上清液加入750 μL Buffer GP3），立即振荡15 s充分混匀，此时可能出现絮状沉淀但不影响后续实验；
- 将上步所得溶液和沉淀分两次加入到吸附柱FlaPure DNA Columns中（吸附柱放入收集管中），12,000 rpm（~13,400×g）离心30 s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中；
- 向吸附柱中加入600 μL Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（~13,400×g）离心30 s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中；
- 重复步骤6；
- 12,000 rpm（~13,400×g）离心2 min，弃废液。将吸附柱开盖置于室温数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液；
- 将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50~200 μL Buffer TE或ddH2O，室温放置2~5 min，12,000 rpm（~13,400×g）离心2 min，收集DNA溶液，如果要增加基因组DNA的得率，可以将离心得到的溶液重新加至吸附膜上，重复洗脱。将洗脱的DNA溶液置于-20℃保存。
常见问题与解决办法
Q1：柱子出现堵塞？
A1：
- 样品用量过多。建议按照说明书推荐量进行提取；
- 样品富含多糖多酚类物质。处理富含多糖多酚的组织，推荐用专用试剂盒；
- 离心温度过低。本产品使用操作均在室温下进行。
Q2：DNA提取得率低？
A2：
- 样品用量过少。建议按照说明书推荐量进行提取；
- 样品材料质量不好。尽量选用新鲜组织样品，样品采集后应液氮速冻，然后置于-80℃保存，建议尽快提取，避免反复冻融；
- 样品裂解不充分。若样品过量则适当减少样品量，加入Buffer GP1后需涡旋振荡1min使其充分混匀，可适当延长裂解时间。
Q3：提取的DNA中有RNA污染？
A3：
- 未加入RNase A消化。请按照说明书要求加入RNase A消化；
- 样品中RNA含量过多。可适当增加RNase A用量或延长消化时间。
