产品描述
本产品用于检测PCR产物、LAMP产物、RPA产物。该产品用胶体金双抗体夹心法检测核酸扩增产物。与传统的琼脂糖凝胶电泳检测相比,核酸检测试纸条操作简单,判读迅速,不含有毒物质,无需任何仪器设备。用户仅需在第一个检测序列引物设计时将一条引物/探针标记生物素Biotin,另一条引物/探针标记异硫氰酸荧光素FITC或6-羧基荧光素6-FAM,在第二个检测序列引物设计时将一条引物/探针标记Dig,另一条引物/探针标记异硫氰酸荧光素FITC或6-羧基荧光素6-FAM。试纸条利用FITC/FAM单克隆抗体进行胶体金标记捕获扩增产物,检测线1上包被抗生物素单克隆抗体,检测线2上包被抗Dig单克隆抗体,当待检样品里有生物素和FITC/FAM或Dig和FITC/FAM修饰的目标检测物时会与金标抗体结合进而与NC膜上抗体结合形成 金标抗体-目标检测物-抗体 的复合物,从而被肉眼辨别为一条红线,即阳性。如果没有红色线出现则为阴性。
产品组分
组分 | 货号 | 规格 |
双靶标核酸扩增产物胶体金试纸条(生物素-FAM/FITC,Dig-FAM/FITC) | DF002 | 20T |
保存条件
2-30℃储存与运输;有效期24个月。
实验流程
1.操作步骤
a) 取出所需数量的试纸条,做好标记。
b) PCR、RPA或RAA反应结束后,取5-10uL扩增产物加至含有样品稀释液的微孔板或离心管中混匀,
c)将试纸条样品垫端朝下插入微孔板或离心管中,常温下放置 10 分钟后判读结果。
d) 使用完毕后,将扩增产物和试纸条装进密封袋,妥善处理。
2.结果判读
a) 阴性(﹣):
C线显色,T1、T2线不显色,判为阴性。
b) 阳性(﹢):
C线显色,T1线显色,判为阳性;
C线显色,T2线显色,判为阳性;
C线显色,T1和T2线均显色,判为阳性。
注:T线弱显色也视为阳性结果。在扩增产物浓度很高的情况下,C线的强度可能会受到影响。尽管如此,C线仍应清晰可见。
c) 无效:
C线不显色,表明操作失误或试纸条已变质失效。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并重新测试。
常见问题解析
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
C线不明显 | ①缓冲液问题 | ①更换缓冲液 |
试纸条阴性但是琼脂糖凝胶电泳有条带 | ①琼脂糖凝胶中检测到非特异性PCR产物 | ①用Southern杂交法检测PCR产物的序列 |
假阳性 | ①器皿或缓冲液污染 | ①更换新的器皿 |
注意事项
1. 本产品为一次性使用产品,请勿重复使用!
2. 请勿使用超过有效期的产品。
3. 根据PCR产物的大小和扩增循环次数,可以检测DNA灵敏度达到5pg。
4. 请严格遵守本说明书的介绍和操作过程。
5. 请在室温条件下(25 ± 5℃)使用本产品,若低温保存,使用前请先将产品恢复至室温。
6. 试纸条在使用前请不要开封,如果发现密封包装破损时请不要使用,袋装的试纸条开封后建议在2小时内使用完毕。
7. 使用完毕后,应尽快将试纸条装进密封袋,妥善处理。
8. 该试纸条适用于科研,其数据不做临床诊断依据。