产品描述
1)本产品是”Ready to Use”即用型RT- RPA冻干颗粒;含有除引物和探针外所有的反应要素,冻干颗粒中包含成分如下:重组酶,聚合酶,单链结合蛋白,ATP,dUTP,dATP,dCTP,dGTP,poly A,TET和PEG 35000等。
2)反应需要14mM 醋酸镁,请与RPA颗粒一起溶解,或根据客户需要添加醋酸镁缓冲液。
3)扩增产品电泳分析,请务必提取核酸;产品直接电泳,大概率观察不到条带。
4)“基础型”适合电泳分析和后续CRISPR检测,“荧光型”含有外切酶或NFO适用荧光探针或试纸条,不适合后续CRISPR分析。
5)RT-RPA扩增试剂可用检测DNA或RNA。
6)若使用核酸释放剂(主要成份为0.5% Triton X-100 或CA-63,pH=8.0),可直接溶解球使用;可任何比例与样本混溶,释放核酸推荐2:1与未处理样本混合后再溶解RPA球。
7)引物建议用Beacon Designer 软件设计引物和探针;引物长度28~35碱基,探针优选45个碱基。
8)试剂盒最低检测下限为10-100 copies/测试(依据引物筛选优化程度和检测手段)。
注意事项
1)开始检测前请仔细阅读本说明书全文,并严格按照要求进行操作。
2)不同类型样品所提取的核酸含量和纯度有差异,可能导致扩增效率不同。
3)当实验室环境、试剂、仪器或配件存在阳性物质(例如质粒、扩增产物等)污染,或样本间存在交叉污染的情况时,会影响检测结果准确性,出现假阳性结果。
4)务必保证试剂保存、配制或运输得当,否则可能导致试剂检测性能下降,出现假阴性结果。
5)阳性对照为质粒,适用于评价本试剂核酸扩增性能。
6)请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行操作。 实验结束后,检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。