PBCV DNA 连接酶也称为SplintR 连接酶或 Chorella 病毒 DNA 连接酶,它能够高效催化相邻的 DNA 核苷酸的连接,这个连接过程需要一条互补的 RNA 在两条 DNA 单链间起“夹板”或“桥梁”的固定作用。PBCV DNA连接酶的这种活性远远优于传统的T4 DNA连接酶,有助于miRNAs和mRNAs,包括SNPs在内的研究方法的创新。另外,在二代测序和分子诊断等众多领域中,PBCV DNA连接酶是富集目的基因的理想选择。它具有稳定的生物活性,对 RNA 介导固定的 DNA 底物亲和性强(米氏常数 Km = 1 nM),能够在复杂的混合物中检测到亚纳摩尔级的特定 RNA。因此,在 RNA 检测技术中,PBCV DNA 连接酶不失为理想选择用酶。 | |
组分 |
组分名称 | 数量 | PBCV DNA Ligase(25 U/μl) | 50μl | 10×PBCV Ligation Buffer | 250μl | |
应用 |
- 单链DNA的连接
- 基于探针法的miRNA的检测
- SNP或剪接体的检测
- RASL分析
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活性定义 |
1 单位指 20 μl 反应体系中,1×PBCV 连接酶反应缓冲液,16℃ 条件下,15 分钟内能使 2 pmol 的DNA:RNA 杂交底物连接反应完成50%所需的酶量。 |
反应温度及失活 |
该酶的最佳反应温度为25度,可在16-37度之间优化,37度可明显提高反应的特异性;该酶在65°C 加热20min即可失活。 |
储存 |
-20℃可保存3年。 |
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