Language
| Protein A -Gold（蛋白A 胶体金试剂） EMS(美国电子显微镜科学公司)长期供应电镜级别的胶体金（免疫金）标记产品。当大部分胶体金（免疫金）试剂在透射电子显微镜（TEM）上不断应用时，它们在扫描电子显微镜（TEM）上的应用也取得了长足的发展，例如，金胶体可以标上抗体来确定培养细胞表面的表面抗原。 电镜级别的胶体金（免疫金）试剂的制备需要高质量的抗体和结合试剂，抗体一般需要经过纯化处理并通过预吸附来降低非特异性反应。 Protein A -Gold （PAG）
以下参数供参考：
每ml中的金颗粒数是大家关注的一个问题，一般来说，颗粒越大，其表面积越大，因此可以粘结的抗体数量越多，最后可以认为一些Fab域粘结在一起，直至没有粘结空间。有些抗体的灵敏度比别的抗体高，这是因为它们的Fab段中的氨基酸没有粘结，那些Fab是自由的。如果灵敏度太低，就要从别的主体样本中检查抗体，因为每个的特点都不同。 蛋白质A比IgG小得多，因此蛋白质A上1nm金颗粒也少。 胶体金的颜色是大家关注的另一个话题，胶体金颗粒在5～20nm之间，吸收波长520nm，呈葡萄酒红色，20～40·nm之间吸收波长530nm，液体为深红色，60nm的金溶液主要吸收波长600nm，金溶液呈兰紫色，若离心去掉较大的金颗粒，溶胶呈红色。 抗体是怎样与金试剂联系起来呢？一般蛋白质加到金试剂颗粒溶液中通过以下途径连接：a).电荷吸收(赖氨酸)b).蔬水性吸收(色氨酸)c).硫磺绑定(半胱氨酸和甲硫氨酸) 问与答： 1.我该选择多大粒度的胶体金产品？ 通常用最小的粒度来满足你的应用。根据金标记的原理，一般较小的微粒标记产品效率更高一点。如果较小的粒度看起来困难，可以选择银加强实验。非常敏感的样品来进行扫描电镜观察，最好选用较大粒度的产品，这可以免去较小粒度需要加强实验的试剂处理。 2.我该选择PROTEIN A/G金标产品还是金标二抗产品？ 这取决于你的实验目的。应用金标二抗产品可以得到更高的标记密度。因此常说金标二抗较金标PROTEIN A更灵敏，这样说并不全面。Protein A/G识别抗体（一抗）分子一个位点与之结合。只有这个位点在时才发生结合，并不随着周围环境的不同呈现模糊图像。 金标二抗识别抗体（一抗）的位点不止一个，这样抗体被检测到的机会大大增加，大大增加了灵敏度。 如果所有的抗体（一抗）结合金标Protein A/G和金标二抗的程度一样，那么用金标二抗结合其上的金颗粒更多。这对于在低放大倍率下抗原的标记更为有效，换句话说，这增加了检测能力。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 温馨提示：不可用于临床治疗。 |
