BlazeTaq SYBR Green qPCR mix

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简介

GeneCopoeia推出的BlazeTaq™ SYBR^® Green qPCR mix 2.0是采用SYBR Green 染料法进行real-time PCR反应的专用试剂，用于目标基因快速、准确的定量检测。它含有热启动抗体修饰的Taq DNA聚合酶和优化的缓冲液，可避免低温下靶DNA的非特异性扩增，提高了Mix的性能。本产品是一种即用型的5×预混液，使用时只需加入模板、引物、灭菌水，即可对模板DNA进行快速、特异性的定量分析。

BlazeTaq SYBR^® Green qPCR mix 2.0采用了新型抗体修饰的BlazeTaq™热启动DNA聚合酶，室温时酶的活性被抗体完全封闭，更有效地抑制非特异性扩增；反应时只需95°C预变性30 s即可使酶完全被激活，可明显地缩短qPCR反应时间。此外，优化的Buffer体系显著提高Real Time PCR反应的灵敏度和重复性，同时具有扩增效率高、特异性强、检测范围广的特点，并能有效抑制引物二聚体的产生，使实验结果更加可靠。

本产品提供了一种通用的反应条件及实验操作流程，且推出带有、或不带有ROX参比染料的两个版本供用户选择，适用于大多数荧光定量 PCR 仪。

产品优势

• 灵敏度高：可检测低至5个拷贝数的DNA模板
• 特异性强：抗体修饰热启动DNA聚合酶，更有效抑制引物二聚体以及非特异性扩增的产生
• 扩增效率高：在宽广的GC含量范围内能维持高扩增效率
• 操作简单：预先配好的5×预混液，反应前只需加入模板、引物、灭菌水
• 适用性广：提供带有或不带有ROX的两个版本可选，适用于大多数荧光定量PCR仪

 

 

 

图1. 使用BlazeTaq™ SYBR^® Green qPCR mix 2.0扩增8个10倍梯度稀释的双链DNA片段，DNA拷贝数范围为5×10⁷~5个拷贝。如图所示，试剂盒显示出高灵敏度的特性，在宽广的定量范围内具有优异的线性相关性。

 

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竞品产品性能对比 使用Hela细胞系的梯度稀释的cDNA扩增B2M基因。BlazeTaq™（红色）与BioRad SsoAdvanced™UniversalSYBR®GreenSupermix（蓝色）的性能对比显示在相似扩增性能下，前者具有更强的信号。

 

BlazeTaq™（红色）与Powerup™SYBR Green Master Mix（绿色）和Promega（蓝色）Gotaq®QPCR Master Mix（绿色）的性能对比显示，其灵敏度、扩增效率和特异性更高。

 

Ct值比较。 使用BlazeTaq™（蓝色），Applied Biosystems的PowerUp™ SYBR Green Master Mix（橙色）和来自Promega的GoTaq®qPCRMaster Mix（灰色）扩增来自10 ng HeLa cDNA的41个基因。

 

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使用BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0分别扩增50个和5个拷贝数的同一个DNA模板，并设无模板对照（NTC组），每组qPCR反应重复24次。结果显示，试剂盒对低浓度模板的扩增实验重复性好。

 

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使用BlazeTaq™ SYBR® Green qPCR mix 2.0分别扩增不同GC含量（GC含量范围在39.3~61.2%之间）的DNA模板。结果显示，各模板的扩增效率仍能维持在90%~110%之间，表明试剂盒对GC含量在一定范围内的DNA模板适用性广。

 

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