新型快速酵母转化试剂盒（酿酒酵母专用）

 新型酵母快速转化试剂盒适用于液体培养的酵母转化或者对生长在平板上的酵母直接进行转化。该产品操作方法简便，转化快速，只需1.5 hr，且无需制备感受态酵母细胞。液体培养的酵母转化的效率高于生长在平板上的酵母的转化效率。

使用说明：

    1.划板。取超低温冰箱中保存的酵母菌种在YPDA固体培养基上划板，放置在30˚C培养箱中培养2-3天，直至长出单克隆。

    2.收集和悬浮酵母细胞。

从平板上获取酵母细胞	从液体培养基中获取酵母细胞
-	选取酵母单克隆，在YPDA液体培养基中过夜培养
-	分装大约5×107个酵母细胞到离心管中。
-	11,000 g 离心15秒，去上清
用灭菌的枪头挑取单克隆酵母细胞悬浮在装有200 μL灭菌的去离子水的离心管中。	用200 μL灭菌的去离子水悬浮细胞

    3.沉淀悬浮的细胞。3,000 g 离心3分钟，弃上清。

    4.在酵母细胞中加入待转化的质粒，每个质粒>1.5 μg。

    5.制备酵母转化液。

    a.Carrier DNA 变性。95˚C变性5分钟，随后放在冰上备用。已经变性的Carrier DNA下次使用时可以放在冰上溶解，不用再重复变性过程。

    b.每个反应需要准备350 μL的转化液，包含：变性的Carrier DNA： 50 μL    辅助转化液：300 μL

    化液直接涂在相应的酵母培养基上，放置在30˚C培养箱中培养2-3天。

注意事项：

    1.Carrier DNA在运输过程中或者长时间保存可能会出现复性的可能，因此在转化前要变性Carrier DNA。

    2.操作中请穿戴实验服和一次性手套，废弃包装袋及用品请弃于专用的垃圾袋内。