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【产品名称】
通用名称：结核分枝杆菌快速鉴定和药敏检测试剂盒（培养法）
商品名称：/
英文名称：Kit of identification and drug sensitivity of Mycobacterium tuberculosis
【包装规格】
10T/盒
【预期用途】
适用于结核分枝杆菌的体外鉴定和药敏测定。
【检验原理】
采用24孔微孔板（本公司专用），分枝杆菌快速变色液体培养基营养丰富，含有多种促进分枝杆菌生长的营养素能促进分枝杆菌生长，抑制剂能抑制其他细菌和真菌生长的抗生素，但不影响分枝杆菌生长，当鉴定试剂或药物能抑制结核分枝杆菌生长时，变色剂不发生氧化还原反应，不发生颜色变化；反之，当鉴定试剂或药物不能抑制结核分枝杆菌生长时，变色剂发生氧化还原反应，产生颜色变化。
【储存条件及有效期】
包装后结核分枝杆菌快速鉴定和药敏检测试剂盒，应贮存在环境温度2℃-8℃干燥处。试剂盒有效期为12个月。
【样本要求】
处于对数生长期的分枝杆菌菌落。
【操作方法】
所有操作按照Ⅱ级生物安全要求进行，用过的吸头浸泡于盛有消毒液的医疗废液瓶中。
1.菌液制备：在Ⅱ级生物安全柜中，用接种环刮取3-4周生长于罗氏培养基（或其他固体培养基）上的菌落，置无菌磨菌瓶（含1-2滴10%吐温80）中，旋紧瓶盖后旋涡混匀。用试剂A调其浊度为MacFarland No1一致（相当于1mg/ml）。
2.加样：在Ⅱ级生物安全柜中，打开24孔微孔板盖子，用微量加样器取试剂A198μl加入对照孔（1A号孔、7A号孔），再取上述菌液2μl加入对照孔，取上述菌悬液200μl加入鉴定孔（1B、7B号孔）和药敏测定孔（2-6、8-12号孔），于对照孔再加入试剂B 1μl，鉴定孔加入试剂D5μl，各孔加入试剂C 50μl，盖紧微孔板盖子。37℃培养，每天观察结果1次，当对照孔变紫红色后，分别加入试剂B 1μl 于鉴定孔和各药敏测定孔底部，37℃培养3小时，观察结果。
【结果判断】
鉴定孔不变紫红色为结核分枝杆菌，变紫红色为非结核分枝杆菌；药敏孔变紫红色为耐药，不变色为敏感。
【检验结果的解释】
每板2份测试,1-6为1份、7-12为1份。1A和7A为对照孔，2-6和8-12分别为SM 、INH 、RFP 、EB 和OFL ，其中A孔为低浓度，B孔为高浓度；1B和7B为鉴定孔。
注：2~6号、8~12号孔分别为SM(1、4μg/ml)、INH（0.1、0.5μg/ml）、RFP（1、2μg/ml）、EB（5、10μg/ml）、OFL（2、4μg/ml）。
【参考值（参考范围）】
无毒的标准株H37Ra（ATCC25177）应鉴定为结核分枝杆菌，药敏测定应为敏感。
【产品性能指标】
1.结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌鉴定及药敏测定时间一般2-8天获得结果；
2.结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌鉴定及药敏测定同时检测。
3.结核分枝杆菌快速鉴定与药敏试剂盒中A、B、C和D外观应整洁，标识应清晰。液体为透明液体，不得有沉淀，颗粒或者絮状物。
4.产品质控：结核分枝杆菌标准株H37Ra（ATCC25177）或卡介苗接种鉴定孔经培养后不生长（不产生颜色变化），偶然分枝杆菌（ATCC6841）接种鉴定孔经培养后生长不受抑制（产生颜色变化）。结核分枝杆菌标准株H37Ra（ATCC25177）接种药敏孔经培养后不生长（不产生颜色变化）。
【产品局限性】
仅用于结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌的鉴定，不能用于非结核分枝杆菌的鉴定。
【注意事项】
1.菌液浓度必须为1mg/ml，且务必混匀，否则对照孔需较长时间才能变色。若菌液均匀，一般在1周内即可获得结果；
2.当对照孔上层液体一旦变色，立即加试剂B 1μl 于鉴定孔和各药敏测定孔底部，37℃培养3小时，否则，对照孔颜色太深，影响结果判断。
3.各项操作和器具必须无菌，否则造成污染后影响试验结果。
4.各项操作应至少在Ⅱ级生物安全柜中操作。
5.使用后的培养板和其他有菌器材须经高压灭菌处理后方可丢弃。
6.试剂盒在有效期内使用。建议同一块微孔板一次完成。
